如何使用MiSeq Reporter重新分析一个run?

MiSeq Reporter会对MiSeq仪器产生的数据进行二级分析。用户可以通过MiSeq Reporter的重新分析的功能对run的数据进行多次重新分析。比较常见的需要重新分析原因有更改分析流程,修改sample sheet文件中的index序列,样本ID,或者样本的名称等。接下来,为大家介绍如何在网页界面上重新分析或者直接在run文件夹中修改sample sheet文件后重新分析的方法。另外, 使用MiSeq Reporter重新进行分析时,请务必确保仪器没有在测序过程中。

如何编辑Sample Sheet文件

  1. 打开D盘MiSeq Analysis中对应run的文件夹。比如:D:\Illumina\MiSeq Analysis\141007_M001_0016_000000000-AB8A8

  2. 使用文本编辑器(比如Notepad)编辑SampleSheet.csv文件。如果您使用电子表格编辑器(如excel),请保证保存该文件始终为逗号分隔的文本(.csv)。另外请不要改变Sample Sheet的格式。

  3. 如果要生成一个新的sample sheet,建议通过重命名的方式对原始文件进行备份,比如把SampleSheet.csv命名为SampleSheet_original.csv。请把新的sample sheet文件命名为SampleSheet.csv放在MiSeq Analysis文件夹。

使用MiSeq Reporter 网页界面的方式对一个run重新分析

  1. 打开Internet Explorer浏览器,在地址栏输入http://localhost:8042后打开MiSeq Reporter网页界面

  2. 在MiSeq Reporter 网页界面中选择左上角的“Analyses” 选项

  3. 在“Analyses”可用于重分析的run列表中找对应的run,单击run旁边的复选框,然后选择Requeue。

在分析的过程中,分析信息选项卡上会显示一个耗时的状态栏。在分析的过程中如果需要提前停止分析,请点击分析选项卡状态栏旁边的Stop图标。

不通过MiSeq Reporter的重新分析方法

  1. 如果用户在设置run的时候选择把数据传输到BaseSpace Sequence Hub上,而没有设置为在本地进行分析,那么在MiSeq Reporter网页界面的“Analyses” 选项中是看不到这个run的。在这种情况下,只能在run的文件夹内重新分析这个run。一旦重新分析后,这个run就会出现在MiSeq Reporter网页界面上。接下来,将会演示如何在run文件夹内重新分析。

  2. 打开D盘的MiSeq Analysis文件夹。比如D:\Illumina\MiSeq Analysis\141007_M001_0016_000000000-AB8A8

  3. 删除这个run文件夹中的queuedforanalysis.txt文件 (或者QueuedForAnalysis.txt文件)。从run文件夹中删除此文件就会触发MiSeq Reporter自动进行分析。该文件将会以QueuedForAnalysis.txt为文件名称在当前日期和时间内重新在该run 的文件夹中出现,表示MiSeq Reporter已经开始运行分析了。

如果您想查看分析的进展状态,请首先打开Internet Explorer网页浏览器并在地址栏输入http://localhost:8042后回车。然后在打开的MiSeq Reporter网页界面的左上角点击 “Analyses” 选项。最后,在列表的最下方就可以看到刚刚重新分析的run,点击这个run进去后就可以看到分析的状态栏。

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