测序前准备和检查NovaSeq 6000 流动槽的最佳操作

测序前对NovaSeq 6000 的流动槽（Flow Cell）进行适当的准备和检查可以减少与真空相关问题的发生，并且可以减少仪器漏气。本技术公告介绍了如何准备和检查NovaSeq 6000 流动槽以保证测序成功。

准备和检查NovaSeq 流动槽的最佳操作

1. 从2℃到8℃储存条件下移除流动槽包装纸盒。

2. 将密封的流动槽包装放置10-15 min，以使得流动槽达到室温。打开包装后需要在12 h内使用流动槽。

3. 检查流动槽的上下表面，以核实是否有任何损坏，例如裂缝或碎屑。

   1. 如果在流动槽的下表面有碎屑或任一表面有裂缝，请联系 Illumina技术支持 评估流动槽。

4. 检查流通槽垫圈内（Gaskets）或附近是否有任何颗粒材料（详见图1。

   1. 如果观察到颗粒，轻轻擦去碎屑或翻转流动槽，然后轻轻敲击桌子上的流动槽以去除颗粒；

   2. 如果无法清除阻塞垫圈的颗粒，请联系 Illumina技术支持 讨论是否继续使用这个流动槽。

图1. 阻塞流动槽垫圈的颗粒材料示例

5. 芯片使用前建议客户对外观进行检查，若看到如下描述的表现，实际并不影响产量或质量，并且性能良好。常见的外观瑕疵主要包括流动槽的可变彩虹色、流动槽中的圆形斑点、流动槽表面或内部的划痕或流动槽表面的碎屑（详见图2）流动槽需经过严格的视觉质量控制（QC），请检查流动槽是否存在其余异常的外观缺陷。

图2. 流动槽表面的可见彩虹色（左）；流动槽内部的圆形斑点（中）；流动槽划痕（右）

6. 在NovaSeq 6000上加载流动槽之前，检查流动槽和NovaSeq 6000 流动槽载物台是否有玻璃碎片或任何碎屑。

   <ol start="1" style="list-style-type: lower-alpha;"><li><span style="font-size: 14px;"><span style="font-family: Verdana,Geneva,sans-serif;">玻璃碎屑可影响成功测序所需的真空密封。想了解更多详细信息，请参阅 <a href="https://www.youtube.com/watch?app=desktop&amp;v=w0QLmN2JSDk" target="_blank">NovaSeq 6000流动槽加载故障排除</a> 视频。</span></span></li><li><span style="font-size: 14px;"><span style="font-family: Verdana,Geneva,sans-serif;">检查流动槽底部是否有玻璃碎片。如果存在玻璃碎片，请用酒精擦拭流动槽的底部。然后用干净、干燥的无尘纸擦干流动槽。</span></span></li><li><span style="font-size: 14px;"><span style="font-family: Verdana,Geneva,sans-serif;">检查NovaSeq 6000的流动槽载物台，包括凹槽、真空管和集合管（Manifolds）</span></span>
   	<ol start="1" style="list-style-type: lower-roman;"><li><span style="font-size: 14px;"><span style="font-family: Verdana,Geneva,sans-serif;">如果流动槽载物台没有碎屑或玻璃碎片，请使用酒精擦拭物清洁流动槽加载位置、集合管（Manifolds）和流动槽夹。用干净、干燥的无尘纸擦去残留的酒精。</span></span></li><li><span style="font-size: 14px;"><span style="font-family: Verdana,Geneva,sans-serif;">如果观察到碎屑或玻璃碎片（见图3），请用酒精擦拭物吸干流动槽载物台以去除碎屑。吸干后，目视检查流动槽载物台确认碎屑已去除。用干净、干燥的无尘纸去除任何残留的酒精。</span></span></li></ol>
   	</li></ol>
   </li></ol>

   

   图3. 在 NovaSeq 6000 流通槽载物台上观察到的玻璃碎片示例

   7. 如有与本技术公告中概述的信息有关的任何问题或疑虑，请联系 Illumina技术支持 。技术支持可以评估是否继续使用流动槽。提供流通槽图片和批次信息可以帮助Illumina提供适当的指导。

   资源：

   • NovaSeq 6000 Sequencing System Guide

   • Troubleshooting NovaSeq 6000 flow cell loading

   For any feedback or questions regarding this article (Illumina Knowledge Article #7097), contact Illumina Technical Support [e-mail].