# 测序前准备和检查NovaSeq 6000 流动槽的最佳操作

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测序前对NovaSeq 6000 的流动槽（Flow Cell）进行适当的准备和检查可以减少与真空相关问题的发生，并且可以减少仪器漏气。本技术公告介绍了如何准备和检查NovaSeq 6000 流动槽以保证测序成功。 \
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**准备和检查NovaSeq 流动槽的最佳操作**

1. 从2℃到8℃储存条件下移除流动槽包装纸盒。
2. 将密封的流动槽包装放置10-15 min，以使得流动槽达到室温。打开包装后需要在12 h内使用流动槽。
3. 检查流动槽的上下表面，以核实是否有任何损坏，例如裂缝或碎屑。
   1. 如果在流动槽的下表面有碎屑或任一表面有裂缝，请联系Illumina技术支持(致电4000665835或者发邮件至<chinasupport@illumina.com>)评估流动槽。
4. 检查流通槽垫圈内（Gaskets）或附近是否有任何颗粒材料（详见图1）
   1. 如果观察到颗粒，轻轻擦去碎屑或翻转流动槽，然后轻轻敲击桌子上的流动槽以去除颗粒；
   2. 如果无法清除阻塞垫圈的颗粒，请联系Illumina技术支持讨论是否继续使用这个流动槽。

![](https://supportassets.illumina.com/content/dam/illumina-support/images/bulletins/2021/08/Preparing_and_inspecting_NovaSeq_6000_flow_cells_for_sequencing_1.jpg)

图1. 阻塞流动槽垫圈的颗粒材料示例

5. 芯片使用前建议客户对外观进行检查，若看到如下描述的表现，实际并不影响产量或质量，并且性能良好。常见的外观瑕疵主要包括流动槽的可变彩虹色、流动槽中的圆形斑点、流动槽表面或内部的划痕或流动槽表面的碎屑（详见图2）流动槽需经过严格的视觉质量控制（QC），请检查流动槽是否存在其余异常的外观缺陷。

![](https://supportassets.illumina.com/content/dam/illumina-support/images/bulletins/2021/08/Preparing_and_inspecting_NovaSeq_6000_flow_cells_for_sequencing_2.jpg)图2. 流动槽表面的可见彩虹色（左）；流动槽内部的圆形斑点（中）；流动槽划痕（右）

6. 在NovaSeq 6000上加载流动槽之前，检查流动槽和NovaSeq 6000 流动槽载物台是否有玻璃碎片或任何碎屑。
   1. 玻璃碎屑可影响成功测序所需的真空密封。想了解更多详细信息，请参阅 [NovaSeq 6000流动槽加载故障排除](https://www.youtube.com/watch?app=desktop\&v=w0QLmN2JSDk) 视频。
   2. 检查流动槽底部是否有玻璃碎片。如果存在玻璃碎片，请用酒精擦拭流动槽的底部。然后用干净、干燥的无尘纸擦干流动槽。
   3. 检查NovaSeq 6000的流动槽载物台，包括凹槽、真空管和集合管（Manifolds）
      1. 如果流动槽载物台没有碎屑或玻璃碎片，请使用酒精擦拭物清洁流动槽加载位置、集合管（Manifolds）和流动槽夹。用干净、干燥的无尘纸擦去残留的酒精。
      2. 如果观察到碎屑或玻璃碎片（见图3），请用酒精擦拭物吸干流动槽载物台以去除碎屑。吸干后，目视检查流动槽载物台确认碎屑已去除。用干净、干燥的无尘纸去除任何残留的酒精。

![](https://supportassets.illumina.com/content/dam/illumina-support/images/bulletins/2021/08/Preparing_and_inspecting_NovaSeq_6000_flow_cells_for_sequencing_3.jpg)

图3. 在 NovaSeq 6000 流通槽载物台上观察到的玻璃碎片示例

7. 如有与本技术公告中概述的信息有关的任何问题或疑虑，请联系Illumina技术支持。技术支持可以评估是否继续使用流动槽。提供流通槽图片和批次信息可以帮助Illumina提供适当的指导。

资源：

* [NovaSeq 6000 Sequencing System Guide](http://emea.support.illumina.com/downloads/novaseq-6000-system-guide-1000000019358.html)
* [Troubleshooting NovaSeq 6000 flow cell loading](https://www.youtube.com/watch?app=desktop\&v=w0QLmN2JSDk)

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