我所购买的SBS试剂盒最多能够满足多少个循环的测序?
为上机测序提供足够量的SBS试剂是确保测序获得成功的重要因素之一。如果运行过程中试剂量不够,会导致荧光信号强度和测序质量值降低,甚至可能引起测序失败。双端测序在不同测序仪上有不同的操作流程,具体可以参照Indexed Sequencing Overview Guide。在某些仪器上运行双端index测序时,还需要额外七个循环的试剂做第二个index测序前的化学合成反应(仅合成不拍照),此时计算试剂盒所能支持的测序循环数时,一定要考虑到这七个循环也要被包含在总循环数内。
下面表格列举出了多种试剂盒的规格及每种试剂盒最多支持的循环数,请将在某些仪器上运行双端index测序时额外的7个循环考虑在内:
Reagent Type
Reagent Kit Size
Maximum Number of Cycles
Additional Cycles Needed for Dual Index?
iSeq 100
i1 v2
300
322
No
High Output or Mid Output
75
92
No
150
168
300
318
MiSeq
v2 (including Micro and Nano kits)
50
79
Yes - 7 cycles
300
329
500
529
v3
150
179
600
629
NextSeq 500/550
High Output or Mid Output
75
92
No
150
168
300
318
NextSeq 1000/2000
P1
100
138
No
300
338
600
638
P2
100
138
No
200
238
300
338*
600
638
P3
50
88
No
100
138
200
238
300
327*
P4
50
88
No
100
138
200
238
300
338
200
238
300
338
500
538
200
238
300
338
200
238
300
338
NovaSeq X / X Plus
1.5B and 10B
100
138
No
200
238
300
338
25B
300
338
*The NextSeq 1000/2000 P1和P2 300 cycle试剂盒含有338个cycles 而 P3 300 cycle 试剂盒含有327个cycles.
关于每种测序试剂盒的详细信息请参阅对应的试剂支持页面,不同测序试剂盒支持的最长读长请参阅Illumina 测序平台的最大读长。
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